土壤提取試劑為從土壤提取DNA提供了方便快速的方法
更新時(shí)間:2021-10-13 點(diǎn)擊次數(shù):554次
土壤中的微生物資源非常豐富,但用傳統(tǒng)技術(shù)培養(yǎng)的微生物僅占微生物總數(shù)的0.01%~10%,且大部分微生物處于不可培養(yǎng)的狀態(tài),使相當(dāng)多的菌種不能被充分地開發(fā)和利用。從土壤中提取的DNA,是微生物、動(dòng)植物等的總DNA。
由于土壤微生物成分復(fù)雜,常規(guī)提取總DNA的方法難以去除腐殖酸,而腐殖酸會(huì)抑制聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增中的TaqDNA聚合酶以及酶切反應(yīng)的限制性內(nèi)切酶活性。
另外,土壤質(zhì)地和成分的差異也會(huì)影響土壤微生物DNA的提取效果。因而,從土壤中提取DNA,腐殖物質(zhì)等抑制因子的去除就成為了重中之重。
如何從土壤樣本中提取純化DNA?土壤提取試劑為從土壤樣本中檢測(cè)微生物提供了一種方便、快速的方法。
所有類型的土壤樣品均可使用該工具包進(jìn)行處理,包括普通土壤樣品和腐殖酸含量高的難處理土壤樣品,如堆肥和糞便。該試劑盒使用提供的OSR(有機(jī)物去除)溶液去除所有微量腐殖酸和PCR抑制劑。
然后使用一種簡(jiǎn)單快速的旋轉(zhuǎn)柱程序進(jìn)一步純化DNA。總基因組DNA可以從土壤中發(fā)現(xiàn)的各種微生物中分離和純化,如細(xì)菌、真菌和藻類。純化的DNA質(zhì)量zui高,與下游PCR應(yīng)用*兼容,因?yàn)樵诜蛛x過程中去除了所有腐殖酸物質(zhì)和PCR抑制劑。
土壤提取試劑具有以下特點(diǎn):
1.快速簡(jiǎn)便的土壤樣品中微生物檢測(cè)方法;
2.處理所有土壤類型,包括常見的土壤樣品和腐植酸含量高的難處理的土壤樣品,如堆肥和糞肥;
3.使用OSR(Organic Substance Removal)溶液去除有機(jī)物質(zhì);
4.從DNA樣本中去除所有腐殖酸;
5.使用快速離心柱形式進(jìn)行快速簡(jiǎn)便的處理;
6.從包括細(xì)菌、真菌和藻類在內(nèi)的各種微生物中分離出高質(zhì)量的總DNA;
7.純化的DNA質(zhì)量很高,*兼容下游PCR應(yīng)用,因?yàn)樵诜蛛x過程中去除了腐殖酸物質(zhì)和PCR抑制劑。